摘要  家蚕微孢子虫（Nosema bombycis，NB）感染家蚕后可通过蚕卵垂直传播，是蚕种生产中的唯一法定检疫对象。鉴定蚕卵中家蚕微孢子虫的高丰度蛋白，可为该病原的检测提供潜在靶点。制备带毒蚕卵，利用RIPA强裂解液提取不同催青时间的蚕卵总蛋白并开展非标记蛋白定量质谱鉴定，根据蛋白质表达水平筛选得到高丰度病原蛋白NBO_76g0007。生物信息学分析表明NBO_76g0007由211个氨基酸组成，预测蛋白质分子质量约为23 kD，等电点约为8.63，存在1个跨膜结构域，推测它是一种膜蛋白。利用原核表达的NBO_76g0007免疫Balb/c小鼠，制备了其单克隆抗体。Western blot显示该单抗特异性识别带毒蚕卵以及孢子中的NBO_76g0007蛋白。免疫定位结果表明，在成熟孢子中NBO_76g0007蛋白主要定位于极膜层和后极泡；在孢原质中NBO_76g0007蛋白集中定位于膜上；此外，孢子发芽后，NBO_76g0007蛋白可定位于极管。综上，本研究系统性地分析了带毒蚕卵中家蚕微孢子虫的蛋白类型和丰度，鉴定到的高丰度蛋白NBO_76g0007及其特异性单抗为带毒蚕卵中家蚕微孢子虫的检测奠定了基础。