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家蚕SDH-2a及Upf2基因在SDH基因敲除突变体内遗传补偿途径中的作用分析
摘要 为探究鳞翅目模式昆虫家蚕体内是否存在遗传补偿途径,以前期构建的家蚕山梨醇脱氢酶基因SDH敲除突变体BmSDH-/-为材料,采用RT-qPCR技术对突变体中的BmSDH同源基因BmSDH-2a和潜在的遗传补偿途径关键因子基因BmUpf1、BmUpf2、BmUpf3a和BmUpf3b-like进行转录水平的分析;在BmSDH-/-突变体蛹期干涉BmSDH-2a和BmUpf2,观察子代卵滞育表型,分析它们在BmSDH-/-突变体子代滞育表型中的功能补偿作用;最后,利用双荧光素酶报告系统在家蚕BmN细胞中验证BmSDH-2a对滞育激素基因DH-PBAN启动子的调控作用。RT-qPCR结果显示,BmSDH-2a和BmUpf2在突变体的卵巢和血淋巴中呈现显著上调表达;对BmSDH-2a和BmUpf2基因RNA 干扰后,BmSDH-/-突变体部分子代蚕卵的滞育性状发生改变;细胞水平的双荧光素酶实验显示BmSDH-2a能显著上调DH-PBAN启动子的活性。上述结果表明,在BmSDH-/-突变体中存在遗传补偿效应,且BmSDH-2a和BmUpf2基因在该效应中发挥重要作用。