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桑枝叶单宁、芦丁和DNJ降解微生物的筛选与鉴定
摘要 桑树是新型高蛋白畜牧饲料资源,但其含有大量单宁、芦丁和1-脱氧野尻霉素(DNJ)等抗营养因子,会降低畜禽鱼的营养代谢率和饲料的适口性。微生物辅助青贮发酵是提高桑枝叶利用率的最好途径。通过单宁、芦丁、DNJ富集平板方法,从桑枝叶自然青贮物料中分离纯化出5个菌株;通过检测细菌rDNA和真菌ITS序列,构建NJ进化树,将5个菌株分别鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)X1、粪肠球菌(Enterococcus faecium)X2、乳球菌(Lactococcus petauri)X3、酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)J1和假丝酵母菌(Candida parapsilosis)J2。桑枝叶粉的液态和固态发酵试验结果表明,枯草芽孢杆菌X1和乳球菌X3降解单宁的效率最优;枯草芽孢杆菌X1和假丝酵母菌J2降解芦丁的效率最优;乳球菌X3和粪肠球菌X2降解DNJ的效率最优。添加枯草芽孢杆菌X1、乳球菌X3和假丝酵母菌J2复合菌剂青贮发酵后,桑枝叶青贮物中单宁、芦丁和DNJ含量分别下降57.73%、75.25%和56.94%,粗蛋白含量提高105.99%,粗脂肪含量下降41.22%;此外,代谢组分析表明,复合发酵后,桑枝叶青贮物中丁酸等有机酸类物质、L-半胱氨酸等氨基酸类物质、吡哆醛等水族维生素、吲哚-3-乙酸盐等激素类物质含量显著提高,而槲皮素等黄酮类物质、α-生育酚等脂族维生素、2-氨基苯酚等有毒有害物质、13S羟基亚油酸等脂肪酸类物质含量显著降低。说明3个菌株复合发酵能够同时降低单宁、芦丁、DNJ的含量,还可提高青贮物营养价值,改善营养结构。研究结果为高品质桑枝叶发酵饲料的生产提供了新的技术方案,为桑饲料的规模化应用提供了科技支撑。