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家蚕肠道单宁和植酸降解菌筛选及对桑叶青贮效果的影响
摘要 家蚕幼虫肠道含有丰富的微生物,其中可能存在能降解桑叶单宁、植酸等抗营养因子的菌种。利用富集培养技术,筛选、分离和鉴定家蚕5龄幼虫肠道中单宁酶和植酸酶产生菌株,并研究其与乳酸菌和纤维素酶协同青贮桑叶的效果。结果显示,从家蚕5龄幼虫肠道共获得8株单宁降解菌(细菌和霉菌)、22株植酸降解菌(细菌、酵母菌和霉菌),以及2株单宁和植酸双降解霉菌菌株,其中尤以霉菌M3降解单宁和植酸的能力最强。M3菌株最适液态发酵温度为30 ℃,最适发酵pH为5。显微镜观察显示,该菌株菌丝顶部呈蘑菇状,内含孢子,孢子为黑色。ITS序列比对显示M3菌株与黑曲霉(Aspergillus niger)的同源序列(GenBank登录号:JF838357.1)相似度达99%,初步认定其为黑曲霉。M3与乳酸菌和纤维素酶协同青贮桑叶15 d,桑叶pH值降低至3.63~3.77,氨氮浓度降低了0.64~1.09百分点,乳酸和乙酸含量分别提高了0.21~0.50百分点和0.33~0.52百分点;M3与纤维素酶联合青贮组CM和LCM的桑叶干物质、酸性洗涤纤维和中性洗涤纤维含量分别降低1.92~2.10百分点、2.68~2.99百分点和7.55~9.38百分点;处理组桑叶单宁和植酸含量显著降低(P<0.05),且M3与乳酸菌联合青贮组LM和LCM的降解率大于与纤维素酶联合青贮组CM的降解率。综上所述,从5龄家蚕幼虫肠道分离到的M3菌株能够同时降解单宁和植酸,其与乳酸菌和纤维素酶协同,能够显著提高桑叶的青贮品质,降低青贮桑叶的酸性和中性洗涤纤维以及单宁和植酸含量。