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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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2019-nCoV N蛋白在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及纯化

【期刊年份】2023年第04期
【作者姓名】海毕瑞1  杨扬1  刘世火2  吴峻2  徐家萍1
【作者单位】1安徽农业大学生命科学学院资源昆虫生物学与创新利用安徽省重点实验室;2上海市生物医药技术研究院

摘要  核衣壳(nucleocapsid,N)蛋白是新型冠状病毒的结构蛋白,与病毒RNA的转录和复制有关。目前,N蛋白已被广泛应用于新型冠状病毒肺炎的检测诊断及治疗。本研究克隆的2019-nCoV-n基因CDS由1 257个碱基构成,编码419个氨基酸。将该基因连接到昆虫表达载体pFastBacTMHTB构建重组Bacmid,转染至BmN细胞中获得重组病毒,将重组病毒注射家蚕蛹体内,收集发病家蚕蛹血淋巴,通过镍柱亲和纯化,SDS-PAGE和Western blot检测表明获得一定纯度具有活性的重组2019-nCoV-N蛋白,为后期进一步开发抗体检测试剂盒鉴定了基础。

关键词  杆状病毒表达系统; 家蚕蛹; 2019-nCoV; 核衣壳蛋白; 蛋白质纯化