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  • 国内刊号:CN 32-1115/S
  • 国际刊号:ISSN 0257-4799
  • 主管部门:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会
    中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:李木旺
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家蚕中心体蛋白基因BmCnn的鉴定及表达分析

【期刊年份】2022年第02期
【作者姓名】蒋霞1  周晓林1  陈鹏1,2  魏昳1  潘敏慧1,2  鲁成1,2
【作者单位】1家蚕基因组生物学国家重点实验室,西南大学;2农业农村部蚕桑生物学与遗传育种重点实验室

摘要  Centrosomin(CNN)是中心粒周围物质(PCM)和星形微管组装所需的核心中心体蛋白,能将PCM锚定到中心粒上,并维持它们之间的适当连接,以确保有丝分裂时中心体的准确分离,进而保证细胞的正常分裂。PCR扩增得到家蚕中心体蛋白基因BmCnn的全长CDS序列,通过生物信息学分析BmCNN蛋白具有典型的CNN_1N结构域并在进化上保守;将PCR扩增产物亚克隆到原核表达载体pET-28a,随后将表达的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,Western blot检测该抗体能够特异性识别家蚕细胞中2种大小不同的BmCNN;利用免疫荧光分析BmCNN的亚细胞定位,结果显示BmCNN定位于细胞质中;半定量PCR检测BmCnn在家蚕5龄第3天幼虫精巢、卵巢、头部等组织中高表达,而在丝腺组织中低表达,Western blot对BmCNN的检测结果与之基本一致。研究结果可为后期解析BmCnn基因的功能奠定基础,为阐明BmCNN在不同细胞分裂形式中的功能差异及具体调控机制提供新的方向。

关键词  中心体蛋白; 多克隆抗体; 基因表达; 胞质分裂